ลำดับโดยเคมีเทอร์มิเนเตอร์แบบย้อนกลับได้

สิ่งนี้อยู่ในมือใช้ dNTP ที่ถูกผูกไว้กับเทอร์มิเนเตอร์แบบย้อนกลับได้ในการดำเนินการแบบวนรอบซึ่งประกอบด้วยการรวมตัวของนิวคลีโอไทด์การถ่ายภาพเรืองแสงและความแตกแยกเทอร์มิเนเตอร์ที่ติดป้ายเรืองแสงจะถูกถ่ายภาพเมื่อแต่ละ dNTP ถูกเพิ่มเข้าไปแล้วจึงแยกออกเพื่อให้รวมกันของฐานถัดไปนิวคลีโอไทด์เหล่านี้คือ ปิดกั้นทางเคมีเพื่อให้การรวมตัวแต่ละครั้งเป็นเหตุการณ์ที่ไม่ซ้ำกัน ขั้นตอนการถ่ายภาพเป็นไปตามขั้นตอนการรวมฐานแต่ละขั้นจากนั้นกลุ่มที่ถูกบล็อกจะถูกลบออกทางเคมีเพื่อเตรียมเส้นใยแต่ละเส้นสำหรับการรวมตัวครั้งต่อไปโดย DNA โพลิเมอร์ ลำดับขั้นตอนต่อเนื่องนี้จะดำเนินต่อไปตามจำนวนรอบที่กำหนดตามที่กำหนดโดยการตั้งค่าเครื่องมือที่ผู้ใช้กำหนด กลุ่มการปิดกั้น 3 'เดิมถูกมองว่าเป็นการกลับรายการของเอนไซม์หรือทางเคมีการดำเนินการทางเคมีเป็นพื้นฐานสำหรับเครื่อง Solexa และ Illumina การจัดลำดับโดยเคมีเทอร์มิเนเตอร์แบบผันกลับได้อาจเป็นวัฏจักรสี่สีตามที่ Illumina / Solexa ใช้หรือ วงจรสีเดียวตามที่แสดงโดยใช้โดย Helicos BioSciences Helicos BioSciences ใช้ "virtual Terminators" ซึ่งเป็นเทอร์มิเนเตอร์ที่ไม่มีการปิดกั้นโดยมีอะนาล็อกนิวคลีโอไซด์ตัวที่สองซึ่งทำหน้าที่เป็นตัวยับยั้ง เทอร์มิเนเตอร์เหล่านี้มีการปรับเปลี่ยนที่เหมาะสมสำหรับการยุติหรือยับยั้งกลุ่มเพื่อให้การสังเคราะห์ DNA สิ้นสุดลงหลังจากการเพิ่มฐานเดียว

ภาพ 155A | เทคโนโลยี PacBio SMRT และ Oxford Nanopore สามารถใช้ DNA ที่ไม่มีการเปลี่ยนแปลงเพื่อเผชิญหน้ากับเมธิล | Nivretta Thatra / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/legalcode) | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:3rd_gen_Epigenetics.png) จาก Wikimedia Commons

ภาพ 155A | เทคโนโลยี PacBio SMRT และ Oxford Nanopore สามารถใช้ DNA ที่ไม่มีการเปลี่ยนแปลงเพื่อเผชิญหน้ากับเมธิล | Nivretta Thatra / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/legalcode) | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:3rd_gen_Epigenetics.png) จาก Wikimedia Commons

ผู้เขียน : Yavor Mendel

การอ้างอิง:

เทคนิคอณูชีววิทยา 1

เทคนิคทางอณูชีววิทยา III

ความคิดเห็น