ไพรเมอร์ไปข้างหน้าและย้อนกลับถูกยึดด้วยโควาเลนต์ที่ความหนาแน่นสูงกับสไลด์ในเซลล์ไหล อัตราส่วนของไพรเมอร์ต่อเทมเพลตบนส่วนรองรับจะกำหนดความหนาแน่นของพื้นผิวของคลัสเตอร์ที่ขยาย เซลล์ไหลจะสัมผัสกับรีเอเจนต์สำหรับส่วนขยายที่ใช้โพลีเมอเรสและการรองพื้นเกิดขึ้นเมื่อปลายด้านที่ว่าง / ส่วนปลายของ "สะพาน" ที่เชื่อมต่อกับโอลิโกเสริมบนพื้นผิว ผลลัพธ์การเปลี่ยนสภาพและการขยายซ้ำในการขยายสัญญาณ DNA ชิ้นส่วนในตำแหน่งที่แยกจากกันหลายล้านแห่งทั่วผิวเซลล์การไหล การขยายเฟสโซลิดเฟสทำให้เกิดคลัสเตอร์เทมเพลตที่แยกออกจากกันเชิงพื้นที่ได้ 100-200 ล้านชิ้นโดยให้ปลายอิสระซึ่งไพรเมอร์ลำดับสากลจะถูกผสมเพื่อเริ่มปฏิกิริยาการจัดลำดับ เทคโนโลยีนี้ได้รับการยื่นขอสิทธิบัตรในปี 1997 จากสถาบันวิจัยชีวการแพทย์เจนีวาของ Glaxo-Welcome (GBRI) โดย Pascal Mayer, Eric Kawashima และ Laurent Farinelli และได้รับการนำเสนอสู่สาธารณะเป็นครั้งแรกในปี 1998 ในปี 1994 Adams และ Kron ได้ยื่นเรื่องต่อ สิทธิบัตรเกี่ยวกับการดำเนินการขยายพื้นผิวที่คล้ายกัน แต่ไม่เป็นโคลนชื่อ "การขยายสะพาน" ที่ดัดแปลงมาสำหรับการขยายโคลนในปี 1997 โดย Church and Mitra
ภาพ 155A | เทคโนโลยี PacBio SMRT และ Oxford Nanopore สามารถใช้ DNA ที่ไม่มีการเปลี่ยนแปลงเพื่อเผชิญหน้ากับเมธิล | Nivretta Thatra / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/legalcode) | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:3rd_gen_Epigenetics.png) จาก Wikimedia Commons
ผู้เขียน : Yavor Mendel
ความคิดเห็น
แสดงความคิดเห็น